Содержание

Можно ли увидеть яйцеклетку невооруженным глазом

Строение и состав яйцеклетки играют определяющее значение в ее функционировании. Так, яйцеклетка содержит в себе огромный запас питательных веществ. По этой причине ее размер в несколько раз превышает мужские сперматозоиды. Размер жизнеспособной женской половой клетки достигает значения 130-150 мкм, тогда как сперматозоид обладает размером около 55 мкм.

Особенности яйцеклетки

Яйцеклетка образуется в процессе овогенеза. Лишь после того, как попадает сперматозоид в яйцеклетку, и происходит ее оплодотворение, из нее начинает развиваться эмбрион. Развивающаяся яйцеклетка называется ооцитом. В период созревания она покидает яичник и, благодаря сокращениям, происходящим в полости маточных труб, продвигается в матку. Подобный выход яйцеклетки, называемый овуляцией, происходит у женщины в среднем один раз в 28-30 дней.

Если сперма и яйцеклетка не встретились, то неоплодотворенная женская половая клетка гибнет спустя 2-5 дней.

Строение и состав яйцеклетки могут изменяться под воздействием мутации. Также часто у женщины начинают вырабатывать не жизнеспособные яйцеклетки, что становится причиной бесплодия. Этот фактор связан с тем, что половые клетки представляют собой наиболее долгоживущие клетки в организме женщины.

Особенности яйцеклетки и ее строения

Строение женской половой клетки во многом обусловлено тем, что яйцеклетка содержит множество компонентов, которые являются необходимыми для осуществления нормального биосинтеза белка. Так, в состав яйцеклетки входят рибосомы, ферменты, м-РНК, т-РНК, а также их предшественники. Особенные регуляторные вещества, которые контролируют процессы, которые происходят с самой женской половой клеткой в разные периоды ее жизни, играют важнейшее значение в процессе дезинтеграции оболочки ядра.

В желтке яйцеклетки содержатся белки, всевозможные жиры, фосфолипиды, а также минеральные соли. Именно им обеспечивается полноценное питание зародыша.

Итак, главные особенности яйцеклетки таковы:

в ее ядре содержится гаплоидный набор хромосом;
цитоплазма яйцеклетки содержит большое количество митохондрий, элементов эндоплазматического ретикулума, свободных рибосом, желточных включений и РНК;
по периферии ядра расположены кортикальные гранулы.

Строение жизнеспособной яйцеклетки

Яйцеклетка обладает специфическими оболочками, выполняющими защитные функции и препятствующими проникновению в нее не достаточно скольких сперматозоидов. Благодаря им также облегчается имплантация зародыша в стенке матки.

Яйцеклетка, в отличие от сперматозоида, чаще всего обладает шарообразной формой. В ней содержится весь набор точно таких же типичных органелл, какими обладает любая клетка.

Яйцеклетку окружает плазматическая мембрана, а снаружи ее покрывает блестящая оболочка, которая состоит из мукополисахаридов. Именно на этой оболочке располагается так называемый лучистый венец или, как ее еще называют, – фолликулярная оболочка, которая представляет собой микроскопические ворсины фолликулярной клетки. Она имеет важнейшую питательную и защитную функцию.

Лишь воздействие нескольких сперматозоидов может разрушить внешнюю оболочку яйцеклетки. Только после подобной «атаки» лишь один или, в крайней ситуации, двое из них ее оплодотворяют.

У яйцеклетки отсутствует свой аппарат активного движения. Для преодоления расстояния в 10 сантиметров, которое она преодолевает по яйцеводу до матки, ей необходимо от 4 до 7 дней. Яйцеклетка имеет плазматическую сегрегацию, это означат то, что с момента оплодотворения до начала дробления яйца в ней проходит равномерное распределение цитоплазмы. Из-за этого процесса в дальнейшем абсолютно всем клеткам будущих тканей она будет доставаться в необходимом количестве.

Строение сперматозоида

Сперматозоид является клеткой, произведенной мужской особью. Иначе ее именуют гаметой. В большинстве случаев в ней содержится гаплоидный или одинарный набор хромосом.

В отличие от яйцеклетки, у сперматозоида размер весьма мал. Единичную клетку можно рассмотреть лишь в окуляр мощного электронного или светового микроскопа. Этот фактор связано с полным отсутствием в ней внушительных объемов цитоплазмы и большим количеством наследственного материала, продуцируемым единовременно.

У типичного сперматозоида имеется головка, в которой располагается ядро, которое выступает носителем наследственной информации, центриоль и акросома. Акросома необходима для разрушения целостности мембраны яйцеклетки, а центриоль призван формировать жгутик. За головкой идет шейка, средняя часть, а также жгутик. Именно с его помощью сперматозоид способен к движению.

Основные отличия строения яйцеклетки и сперматозоида

Яйцеклетка и сперматозоид обладают кардинально разным строением, которое вызвано их функциональным предназначением.

Размер клеток различается очень сильно. Сперматозоиды являются самыми миниатюрными клетками живого организма. Оплодотворенную яйцеклетку можно увидеть даже невооруженным глазом.

Количество клеток выступает еще одним приспособлением видов к выживаемости. Мужским организмом продуцируется выброс миллионов сперматозоидов, а женским – одна или в некоторых случаях несколько яйцеклеток за какой-то определенный период времени (обычно 28-30 дней).

Без яйцеклетки сперматозоид не способен быть источником формирования зиготы, а в дальнейшем – нового организма. В ходе партеногенеза неоплодотворенная яйцеклетка может быть источником зарождения полноценного организма (у некоторых видов животных).

Я студент в области, не связанной с биологией или медициной, однако мне очень нравится читать об этом. Я только что прочитал в руководстве Мерк, что

Human cells vary in size, but all are quite small. Even the largest, a fertilized egg, is too small to be seen with the naked eye.

Очень быстрый поиск в Google (вызванный базовыми знаниями биологии начальной школы) приводит к статье в Википедии, в которой говорится, что яйцеклетка, как правило, не способна к активному движению, и она намного больше (видима невооруженным глазом)

Я что-то здесь неправильно истолковал или читаю ненадежный источник? Руководство Merck было рекомендовано для изучения этих вещей, так как оно поддерживается врачами, поэтому мне просто интересно. Спасибо!

Ответы

Строка, которую вы цитируете на странице Википедии, говорит о яйцеклетке в целом, тогда как ваш вопрос касается конкретно яйцеклеток человека. В разделе «Ова человека и млекопитающего» той же статьи говорится, что

Клетка яйцеклетки — одна из самых больших клеток в организме человека, обычно видимая невооруженным глазом без помощи микроскопа или другого увеличительного устройства.

При заявленном среднем размере 0,12 мм в диаметре (та же статья в Википедии) яйцеклетка очень и очень мала, но, вероятно, человек все еще может видеть ее без посторонней помощи.

Человек – самое удивительное существо, которое создала матушка-природа. Он не перестает быть в центре внимания ученых и докторов. Изучается не только его происхождение, поведение и внешний вид, но и организм. Именно эта сложная и запутанная система позволяет нам жить. А еще организм – это маленькая вселенная, где так много всего непознанного и необъяснимого. Интернет-издание собрало подборку интересных фактов о человеке, которые покажутся Вам невероятными, а местами непонятными и даже забавными.

Яйцеклетка – самая большая клетка человека, а сперматозоид – самая маленькая

Клетки мышц и кожи являются настолько крошечными, что их нельзя увидеть невооруженным глазом. С женской яйцеклеткой, имеющей круглую форму, все обстоит иначе. Ведь это самая крупная клетка человеческого организма.

Увидеть яйцеклетку вполне возможно невооруженным глазом в чашке Петри. По размеру она выглядит, как маковое зернышко.

А вот сперматозоид по сравнению с другими клетками мужского организма имеет совсем маленькие размеры. Такая особенность позволяет «головастику» без особого труда проникнуть в яйцеклетку и оплодотворить ее.

Роговица глаза – единственная часть тела, куда не поступает кровь

Казалось бы, что кровоснабжение охватывает все тело, начиная с головы и заканчивая пятками. Но не тут-то было. Существует такой участок тела, который от природы не имеет кровоснабжение. Это роговица глаз. Лишенная кровеносных сосудов, она является абсолютно прозрачной. А для питания клеток она получает кислород из воздуха. Поэтому роговица спокойно обходится без работы легких и кровеносной системы. Стоит заметить, что ночью во время сна кислород меньше попадает на нее, поскольку в это время веки полностью закрыты. То же самое происходит и при ношении контактных линз.

Человеческий мозг – «компьютер», вмещающий весь интернет

Существует множество интересных фактов о человеке. Одни уже стали привычными для каждого из нас, а вторые дают время для размышлений. Уникальным органом, который не дает покоя ни ученым, ни медикам, является мозг. Он не перестает удивлять своей сложностью и все новыми и новыми открытиями в плане его функций возможностей. Так, американские нейрофизиологи из института Салка высчитали, какую емкость имеет память человека. Результаты поражают – несколько петабайт. Этого вполне должно хватить для того, чтобы поместить весь контент интернета.

Одно легкое меньше другого – нормальное явление

Большинство из Вас, изучая биологию в школе, наверняка думали, что оба легких имеют один размер. Но это не совсем так. Природа создала левое легкое меньшим за правое, хотя на картинках они практически ничем не отличаются друг от друга по размеру. Такое явление объясняется тем, что сердце смещено от середины влево. Поэтому легкое оставляет для этого органа немного места. Такая неравномерная вместительность воздуха в легких не мешает человеку нормально дышать и никак не отражается на его самочувствии.

Женщины лучше чувствуют запахи, чем мужчины

Обаяние – удивительное свойство, благодаря которому мы различаем множество различных запахов, как приятных, так и не очень. Именно это чувство позволяет нам познавать мир во всей его полноте. И, как показывают научные исследования, обаяние лучше развито у женщин, чем у мужчин.

Женщины лучше различают запах цитрусовых, корицы, кофе, ванили и мяты, чем представители сильной половины человечества.

Такой интересный факт о человеке женского пола ученые Федерального университета Рио-де-Жанейро объясняют тем, что в женском мозгу содержится клеток, отвечающих за восприятие запахов, на 50 % больше, чем в мозгу мужчины.

Люди гораздо дольше могут прожить без еды, чем без сна

Мнение о том, что без еды нельзя прожить несколько суток, а без сна – можно, считается ошибочным. По словам медиков, человек может прожить без пищи до 2 месяцев, но только при условии, что он употребляет достаточное количество воды и имеет в своем организме запас жира. А вот без сна так долго не протянуть. Ведь при отсутствии этого жизненно важного процесса в психике наблюдаются различные негативные изменения: раздражительность, нарушение внимания и координации движений, провалы в памяти, галлюцинации. Также, длительное бодрствование – это колоссальная нагрузка на сердце и остальные органы. И организм, как правило, не выдерживает.

Практически каждый ребенок рождается с голубыми глазами

Характер и внешность обычно передаются ребенку от родителей. Это касается и повадок, и голоса, и типа волос, и цвета глаз. Особенный интерес вызывает последнее. Ведь почему-то детки рождаются не с карими и не с зелеными глазами, как у их предков, а с голубыми. Такое явление специалисты объясняет тем, что пигмент меланин, содержащийся в радужной оболочке, требует немного времени для того, чтобы под воздействием света проявиться и продемонстрировать истинный цвет глаз ребенка. А какой он будет – темный или более светлый, зависит от света и генетики.

Еще несколько интересных и забавных фактов о человеке:

• Во время страстного поцелуя в мозгу возникают такие же химические реакции, как при прыжке с парашютом.
• Кошмары, которые случаются по ночам, являются следствием того, что человек спит в холодной спальне.
• По мнению ученых, дети считаются самыми улыбчивыми созданиями на земле, поскольку они смеются около 400 раз в день, в то время как взрослые – всего лишь 15.
• Если глаза человека на протяжении жизни по размеру практически не изменяются, то нос и уши растут.
• Ямочки на щеках – это далеко не всегда врожденная особенность. Создать такую красоту можно и с помощью специальных упражнений.

Надеемся, что эти факты помогут Вам лучше узнать себя и свой организм.

Эмбриологический этап ЭКО

День 0- пункция фолликулов и оплодотворение:

На тот момент, когда в процессе ЭКО осуществляется пункция фолликулов, яйцеклетки находятся в комплексе ооцит+cumulus, иногда и с частицами фолликулярного эпителия.

Фолликулярную жидкость проверяют на наличие комплексов яйцеклеток+cumulus. Как правило, яйцеклетки можно разглядеть невооружённым глазом, выглядят они как слизистые сгустки размером 5-10 мм.

После того, как ооциты помещены в культуральную среду, специалист предварительно оценивает их количество, качество и степень зрелости. Причём комплексы ооцит +cumulus не всегда позволяют дать истинную оценку яйцеклетки.

У пунктированной яйцеклетке должно быть закончено первое деление мейоза, после которого отделяется первое полярное тельце. Второе деление, как правило, находится в стадии метафазы. Хромосомы образуют ряд, создавая тем самым метафазную пластинку, располагающуюся прямо над полярным тельцем. При этом в яйцеклетке осуществляется блок мейоза, снять который способен лишь сперматозоид, проникнувший сквозь оболочку.

Сперматозоиду, перед тем, как проникнуть в ооцит, следствием чего становится оплодотворение яйцеклетки, предстоит преодолеть ряд препятствий:

1) Сumulus — проникая вовнутрь него глубже, сперматозоид увеличивает свою скорость, демонстрируя фазу гиперактивности.

2) Zona pellucida — здесь сперматозоид связывается с рецептором.

После этого осуществляется акросомная реакция, при которой цитоплазматическая мембрана яйцеклетки и мембрана акросомы сперматозоида объединяются. Содержимое акросомы выбрасывается, связывается с zona pellucida и сперматозоид проникает через оболочку яйцеклетки, не теряя своей активности.

На том месте, которое располагается между оболочкой яйцеклетки и zona pellucida, сперматозоид присоединяется своими рецепторами к рецепторам, которые располагаются на оболочке яйцеклетки. Это способствует возникновению кортикальной реакции, которая становится причиной необратимых процессов zona pellucida, что делает её недоступной для проникновения других сперматозоидов.

День 1 – оценка оплодотворения:

Через 16-18 часов оценивается наличие признаков оплодотворения и качество зигот. Наличие в яйцеклетке 2-х пронуклеусов (PN) и 2 полярных тел (PB) указывает на нормальное развитие процесса оплодотворения. Пронуклеусы — это ядра половых клеток (сперматозоида и яйцеклетки) несущих по половине генетического материала от каждого родителя.

На этой стадии очень важно отбраковать аномально оплодотворившиеся эмбрионы: моноплоиды (1 пронуклеус), триплоиды (3) и полиплоиды(4 и более).

Зиготы с 3 ядрами (пронуклеусами) могут появлятся в результате:

1. Оплодотворения ооцита 2-мя сперматозоидами (чаще всего 2-мя сперматозоидами оплодотворяются яйцеклетки неудовлетворительного качества)

2. Оплодотворения ооцита аномальным сперматозоидом с двойным набором хромосом (все клетки человека имеют 46 хромосом-диплоидный набор. Зрелая яйцеклетка и сперматозоид имеют 23-гаплоидный набор. Образование сперматозоида с двойным набором хромосом (46) происходит при нарушениях процесса созревания гаметы)

3. Невыделения ооцитом 2-го полярного тельца (изначально незрелая яйцеклетка содержит 46 хромосом. Процесс созревания яйцеклетки — это хромосомные преобразования ведущие к формированию ооцита с гаплоидным набором хромосом. Гаплоидность достигается за счёт выделения 2-х полярных телец. Первое формируется у яйцеклетки готовой к оплодотворению, второе можно увидеть после оплодотворения, т.е. в норме видно 2 полярных тельца)

Полиплоиды появляются в результате оплодотворения яйцеклетки неудовлетворительного качества несколькими сперматозоидами или в результате сочетания вышеперечисленных факторов.

День 2- начало дробления

На 2-е сутки после слияние генетического материала сперматозоида и яйцеклетки происходит дробление — деление клетки на 2 и 4. Клетки дробящегося эмбриона называются бластомерами.

На этой стадии можно оценить качество эмбриона по степени фрагментации (%безъядерных фрагментов цитоплазмы), чем она больше — тем ниже считается потенциал этого эмбриона к имплантации и дальнейшему развитию. Помимо фрагментации оценивается форма и относительные размеры бластомеров (T.Hardarson, 2001). Наиболее общепринятая классификация дробящихся эмбрионов по качеству — A-B-C-D, где A — самый лучший, D — самый худший. Цифрами указывают количество бластомеров.

Оценка качества эмбрионов по степени фрагментации:Тип А — эмбрион отличного качества без ануклеарных (безъядерных) фрагментов (4А)

Тип В — эмбрион хорошего качества с содержанием ануклеарных фрагментов до 20% (4В)

Тип С — эмбрион удовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов от 21% до 50% (4С)

Тип D — эмбрион неудовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов более 50% (4D)

Пример записи — (6В) — 6 клеточный эмбрион хорошего качества с содержанием ануклеарных фрагментов до 20%

На этой же стадии оценивается равномерность бластомеров и количество ядер в них (в норме по 1).

День 3 – дробление

Еще через сутки эмбрион, как правило, уже состоит из 6-8 бластомеров. По литературным данным, «генетическая машина» эмбриона запускается на 4-х клеточной стадии, в конце вторых — начале третьих суток развития. До этого момента эмбрион развивался как бы «по инерции», исключительно на материнских «запасах», накопленных в яйцеклетке за время ее роста и развития в яичнике. Если «генетическая книга», в которой закодирована программа нормального развития эмбриона, содержит ошибки: «опечатки»-мутации, «нет нужных страниц»-делеции или «лишние страницы» — дупликации, эмбрион останавливается в развитии. Это природный процесс отбора генетически нормальных эмбрионов. Поэтому именно на стадии 4-8 бластомеров 4-19% эмбрионов останавливаются в развитии (так называемый «блок развития»).

День 4 — морула

На 4-е сутки развития эмбрион человека состоит уже, как правило, из 10-16 клеток, межклеточные контакты постепенно уплотняются и поверхность эмбриона сглаживается (процесс компактизации) — начинается стадия морулы (от лат. morulae — тутовая ягода). К этой стадии in vivo (в организме матери) эмбрион попадает из маточной трубы в полость матки. К концу 4-х суток развития внутри морулы постепенно образуется полость — начинается процесс кавитации.

Оценка морулы / компактизованного эмбриона:

(A) Grade 4: эмбрион полностью компактизован. Клеточные мембраны видны нечетко, но ядра различимы.

(B) Grade 3: компактизовано более 75% бластомеров. Эмбрион сохраняет сферичную форму и гладкую поверхность.

(C) Grade 2: частичная компактизация (около 50% бластомеров), аномальная морфология эмбриона.

(D) Grade 1: компактизация менее 50% бластомеров. Различимы фрагменты и некомпактизовавшиеся бластомеры.

Пример записи — (М3) — морула с компактизацией более 75% бластомеров.

День 5 — бластоциста

С того момента, как полость внутри морулы достигает 50% ее объема, эмбрион называется бластоцистой.

В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4-х до середины 6-х суток развития, чаще это происходит на 5-е сутки. Бластоциста состоит из двух популяций клеток — трофобласт (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотный комок клеток). Трофобласт отвечает за имплантацию — внедрение эмбриона в маточный эпителий (эндометрий). Клетки трофобласта дадут в дальнейшем начало всем внезародышевым оболочкам развивающегося плода, а из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка. Чем больше полость бластоцисты и лучше развита внутренняя клеточная масса и трофобласт — тем больше потенциал эмбриона к имплантации. Когда полость бластоцисты достигает значительного размера, истончившаяся за счет растяжения блестящая оболочка (ZP) разрывается и начинается процесс хэтчинга (выклева) эмбриона из блестящей оболочки. Только после окончания этого процесса бластоциста способна имплантироваться (прикрепиться) в эндометрий матки. Имплантация происходит, как правило, на 6-7 день развития эмбриона.

Классификация эмбрионов на стадии бластоцисты.

1 степень — ранняя бластоциста, полость бластоцисты меньше половины объема эмбриона.

2 степень — полость бластоцисты больше половины объема эмбриона.

3 степень — полная бластоциста. Полость полностью занимает объем эмбриона.

4 степень — расширенная бластоциста. Полость бластоцисты становится больше и начинает истончаться ZP.

5 степень — трофэктодерма ничинает проникать через ZP.

6 степень — вылупившаяся бластоциста, покинувшая ZP.

Внутриклеточная масса (ВКМ):

А — плотно упакованная с большим количеством клеток.

В — более свободная группировка среднего количества клеток.

С — незначительное количество клеток

Трофэктодермальный слой:

А — много клеток, формирующих трофэктодерму.

В — немного клеток.

С — незначительное количество больших клеток.

Пример записи — (4АА) — расширенная бластоциста, вкм — плотно упакованная с большим количеством клеток, много клеток формирующих трофэктодерму.

Остановимся на этих этапах подробнее, так как именно понимание процессов, происходящих в лаборатории, позволяет понять многие моменты, связанные с реализацией программы ЭКО.

ТРАНСВАГИНАЛЬНАЯ ПУНКЦИЯ ФОЛЛИКУЛОВ

Пункция фолликулов представляет собой забор содержимого фолликулов, который осуществляется с помощью специальной иглы под контролем УЗИ. Сразу после получения (для соблюдения необходимого температурного режима в 37 градусов) эмбриологу передают пробирку с фолликулярной жидкостью, в которой содержится множество компонентов — яйцеклетка в клетках кумулюса (ооцит-кумулюсный комплекс), сама фолликулярная жидкость, клетки фолликула, мелкие сгустки крови.

Основная задача эмбриолога на данном этапе — максимально быстро визуализировать ооцит-кумулюсный комплекс, выделить его и поместить в специальную питательную среду, в которой он будет находиться до момента оплодотворения в условиях инкубатора. Лаборатория нашей клиники оснащена нагревательными поверхностями (Minitube) на всех этапах получения и передачи яйцеклеток от врача эмбриологу, что позволяет создать оптимальный температурный режим, что очень важно на данном этапе, т.к. перепады температуры критичны для дальнейшего развития эмбрионов.

ОБРАБОТКА ЭЯКУЛЯТА

В то время, как полученные ооциты помещаются на 2–3 часа до момента оплодотворения в инкубатор, проводится обработка эякулята супруга (свежего или замороженного), либо донорской спермы.

Целью данной обработки является выделение подвижной фракции морфологически нормальных сперматозоидов, очистка их от семенной плазмы, неподвижных форм сперматозоидов, сопутствующих клеток, которые могут оказать негативное влияние на функцию и ДНК нормальных сперматозоидов.

Оплодотворение полученных ооцитов (стандартное или методом ИКСИ)

Оплодотворение полученных ооцитов — ключевой момент программы ЭКО. Неправильный выбор метода оплодотворения может свести на нет все предшествующие этапы и поставить крест на результативности программы ЭКО. Существуют 2 возможных методики оплодотворения в программе ЭКО:

  • стандартный;
  • ИКСИ — интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида внутрь яйцеклетки (intracytoplasmicspermatozoidinjection — ICSI).

Выбор метода оплодотворения в первую очередь определяется показателями спермограммы. При нормальных показателях эякулята в день пункции и при отсутствии других показаний, оплодотворение проводится стандартным методом.

При стандартном методе происходит «имитация» естественного процесса оплодотворения, когда в питательную среду к яйцеклетке помещается суспензия отмытых сперматозоидов и самый сильный и самый подвижный сперматозоид самостоятельно оплодотворяет яйцеклетку.

ИКСИ — в первую очередь способ преодоления мужского бесплодия, т.е. основными показаниям для его проведения являются различные отклонения в спермограмме.

Метод ИКСИ подразумевает собой отбор под микроскопом самого подвижного, самого визуально правильного
(по строению) сперматозоида и введение его в цитоплазму яйцеклетки с помощью специальной микроиглы. Использование этой методики позволяет получить оплодотворение при самых тяжелых формах мужского бесплодия, даже при наличии единичных сперматозоидов в эякуляте, либо при применении хирургических методов получения сперматозоидов из яичка или придатка яичка.

ИКСИ является одним из самых высокотехнологичных методов ВРТ, поэтому требует использования современного специализированного оборудования (инвертированный микроскоп Nikonclipse, микроманипулятор NarishigeTakanome) и качественных расходных материалов (Origio, COOK, Vitrolife).

Другие возможные показания для проведения ИКСИ (по приказу Минздрава № 107н):

  • эякуляторная дисфункция (ретроградная эякуляция);
  • отсутствие или низкий процент оплодотворения (менее 20 %) ооцитов в предыдущей программе ЭКО;
  • малое количество ооцитов (менее четырех) (относительное показание);
  • оплодотворение размороженных ооцитов;
  • при необходимости проведения преимплантационного генетического тестирования (относительное показание).

В определенных ситуациях, эмбриолог может рекомендовать в рамках оплодотворения методом ИКСИ дополнительно использовать чашку ПИКСИ (PICSI — PhysiologicIntraCytoplasmicSpermInjection).

Суть методики PICSI заключается в том, что морфологически правильные и зрелые сперматозоиды с нормальным генетическим материалом имеют на своей поверхности достаточное количество рецепторов к гиалуроновой кислоте, что позволяет им связываться с нею на поверхности чашек PICSI. На основании этого мы косвенно можем судить о качестве генетического материала сперматозоида, который мы потенциально выбираем для оплодотворения ооцит. Для спермы со слабой связывающей способностью с гиалуронатом при проведении теста HBA, отмечено значительное увеличение показателя клинических беременностей при использовании ПИКСИ в рамках процедуры ИКСИ. Использование связанных с гиалуронатом сперматозоидов обеспечивает проведение ИКСИ лучшими из пробы сперматозоидами.

КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ЭМБРИОНОВ

После наших манипуляций яйцеклетки помещаются в инкубатор, и через 16–20 часов проводится оценка факта оплодотворения. В случае, если оплодотворение произошло правильно, зигота начинает свое культивирование до стадии бластоцисты в условиях эмбриологической лаборатории. Этот процесс проходит в рамках непрерывного нахождения эмбриона в инкубаторах, в условиях, максимально приближенных к условиям материнского организма. Газовая смесь с пониженным содержанием кислорода, постоянная температура 37 градусов, оптимальная влажность и рН, отсутствие света и вредных влияний окружающей среды поддерживаются с помощью современных инкубаторов ведущих фирм производителей (PlanerOrigio, Binder). В нашей лаборатории мы проводим культивирование эмбрионов согласно мировым тенденциям до 5–6 суток развития, и программа завершается переносом эмбрионов в полость матки или криоконсервацией эмбрионов, либо сочетанием этих процедур.

Перенос или криоконсервация эмбрионов

Перенос эмбрионов в полость матки является одним из самых важных и уж точно одним из самых волнительных этапов программы ЭКО. Именно перенос эмбрионов делит ЭКО на до и после. В нашей клинике для проведения переноса эмбрионов используются самые современные и безопасные катетеры ведущих мировых производителей (СООК, Wallace, Gynetics, Kitazatoи т.д.). Это позволяет добиться отличных результатов программы ЭКО. В случае, если перенос эмбрионов не рекомендуется, к примеру, при прогрессировании синдрома гиперстимуляции яичников, мы можем заморозить (криоконсервировать) эмбрионы для их сохранения.

Криоконсервация – один из самых перспективных методов ВРТ. В современных условиях, криоконсервация – абсолютно безопасный и невероятно эффективный способ реализации программы ЭКО. Существует 2 вида криоконсервации:

  • медленное замораживание;
  • витрификация.

Во всём прогрессивном мире и, естественно, в нашей клинике, в настоящее время используется именно последний метод – витрификация, по причине своей безопасности, высокой эффективности в плане выживаемости эмбрионов после разморозки и, как следствие, высокого процента наступления беременности.

Криоконсервация эмбрионов и ооцитов позволяет:

  • модифицировать циклы ЭКО с невероятной эффективностью;
  • профилактировать тяжелые формы синдрома гиперстимуляции яичников;
  • реализовывать программы ЭКО с преимплантационным генетическим тестированием и сохранять материал для реализации репродуктивной функции в будущем, без дополнительной гормональной нагрузки на организм.

Вспомогательный хетчинг (по показаниям)

При некоторых обстоятельствах, в рамках программы ЭКО, может понадобиться применение вспомогательного хетчинга (ВХ). Вспомогательный хетчинг (ВХ) — это надсечение, истончение или полное удаление блестящей оболочки эмбриона, с целью облегчить его вылупление из оболочки и последующую имплантацию. С помощью ВХ можно преодолеть проблемы, связанные с затвердеванием блестящей оболочки, обеспечить более ранний контакт эмбриона с эндометрием, что ведет к инициации имплантации.

Ряд клинических показаний для проведения вспомогательного хетчинга:

  • повышенный базальный уровень ФСГ;
  • предшествующая криоконсервация эмбрионов;
  • толщина блестящей оболочки более 18 нм;
  • повышенный процент фрагментации эмбриона и количество бластомеров менее 6;
  • последующая биопсия эмбриона.

Спектр показаний для выполнения вспомогательного хетчинга в рамках программ ВРТ в разных клиниках может варьироваться, т.к. до сих по не существует единогласного мнения относительно необходимости его выполнения в том или ином случае, существует множество взаимоисключающих исследований о целесообразности применения вспомогательного хетчинга в рамках реализации программ ВРТ. Но в любом случае, и это, пожалуй, самое важное, грамотно выполненный вспомогательный хетчинг не ухудшает результат программы ВРТ.

В нашей клинике используется лазерный хетчинг, который не требует использования дополнительных расходных материалов, эмбрион находится вне инкубатора считанные секунды, и вероятность повреждения клеток при данной манипуляции минимальна. Для этого используется специальный высокотехнологичный лазер с компьютерным оборудованием и программным обеспечением.

Биопсия эмбриона при необходимости проведения
преимплантационного генетического тестирования

Необходимо напомнить, что проведение хетчинга является неотъемлемым компонентом реализации программы ЭКО с преимплантационным генетическим скринингом.

Для получения материала и проведения преимплантационной генетической диагностики могут использоваться следующие процедуры:

  • биопсия полярного тельца;
  • биопсия бластомера;
  • биопсия трофэктодермы.

В нашей клинике мы преимущественно проводим преимплантационное генетическое тестирование с использованием материала после биопсии трофэктодермы, так как во всем мире на данный момент это считается «золотым стандартом» генетической диагностики.

Таким образом, эмбриологическая лаборатория нашей клиники является одной из самых современных в Европе, оборудована по последнему слову техники для решения самых сложных задач репродукции, включая самые современные протоколы криоконсервации и преимплантационной генетической диагностики. Уровень оборудования и оснащения нашей клиники и эмбриологической лаборатории, идеи и новации, реализованные при ее планировании, опыт репродуктологов и эмбриологов, работающих в команде и «болеющих» за общее дело, позволяет реализовывать самые современные программы ЭКО с постоянно высоким показателем эффективности.

Четвёртый этап.
Начинается эмбриологический этап во время пункции.
К пункционной игле присоединен специальный насос, при помощи которого происходит забор фолликулярной жидкости из фолликулов яичника вместе с находящимися в них яйцеклетками. Пробирки с фолликулярной жидкостью сразу передаются эмбриологу для оценки наличия и качества ооцитов.
В этот же день муж сдает эякулят и эмбриолог начинает работу с половыми клетками, оплодотворяет их (ЭКО/ИКСИ).
На следующий день после пункции проводят оценку оплодотворения. И дальше в течение нескольких дней эмбрионы продолжают развиваться в условиях эмбриологической лаборатории.
В течение этого периода лечащий врач информирует Вас о развитии эмбрионов и назначает день переноса.
В течение периода после пункции до переноса обращайте внимание на Ваше самочувствие, температуру тела, характер выделений из половых путей, ощущения внизу живота, объем живота, характер мочеиспускания.

Читайте:

Этапы программы ЭКО
Первый этап – Подготовка к программе ВРТ
Второй этап – Стимуляция овуляции
Третий этап – Трансвагинальная пункция фолликулов яичников
Пятый, шестой этапы – Перенос эмбрионов. Посттрансферный период.

Tags: Эмбриологический этап

Пронуклеус

Процесс оплодотворения в клетке мыши

Пронуклеусы (лат. pronucleus от др.-греч. προ «пред» и лат. nucleus «ядро», то есть «предшественник ядра») — гаплоидные ядра гамет в составе зиготы (гаплоидные ядра зиготы). В процессе оплодотворения в яйцеклетке формируется два клеточных ядра — мужское и женское. Женское ядро (женский пронуклеус) образуется из генетического материала яйцеклетки и несёт «материнские» хромосомы. Мужское ядро (мужской пронуклеус) образуется из ядра проникшего в яйцеклетку сперматозоида и несёт «отцовские» хромосомы. Мужской пронуклеус не гомологичен ядру сперматозоида, поскольку после проникновения в яйцеклетку ядро сперматозоида разрушается (ядерная оболочка растворяется, хроматин деконденсируется, белки-протамины ядерного хроматина мужского происхождения удаляются и заменяются белками-гистонами материнского происхождения, ядерная оболочка выстраивается заново из материала яйцеклетки). Пронуклеусы образуются на некотором удалении друг от друга, но вскоре начинают сближение. У ряда видов животных (например, у аскарид) сближение пронуклеусов происходит по спиралевидной траектории и обозначается устойчивым выражением «танец пронуклеусов». После сближения пронуклеусов происходит объединение хромосом матери и отца в единый генотип эмбриона. Лишь у немногих групп животных (например, иглокожие, в том числе классический объект эмбриологии — морской ёж) объединение хромосом происходит в форме слияния пронуклеусов в общее ядро зиготы (с образованием общей ядерной оболочки) — синкарион. У большинства животных (и человека) слияния пронуклеусов не наблюдается, после сближения мужского и женского пронуклеусов их ядерные оболочки растворяются, и хромосомы выстраиваются в метафазную пластинку первого клеточного деления зиготы. Таким образом, в зиготе объединение материнских и отцовских хромосом происходит в форме образования общей метафазной пластинки.

Пронуклеусы у человека

В зиготе человека пронуклеусы становятся видны в световой микроскоп спустя 12-14 часов после проникновения сперматозоида в яйцеклетку. Пронуклеусы формируются вблизи друг от друга, их сближение не имеет сложный характер (о «танце пронуклеусов» применительно к человеку не говорят). Спустя 19-22 часа после проникновения сперматозоида ядерные мембраны пронуклеусов исчезают и формируется метафазная пластинка. Ещё спустя 3-4 часа происходит деление зиготы.

Наблюдение за пронуклеусами человека стало возможным благодаря технологии экстракорпорального оплодотворения, когда оплодотворение и раннее развитие человека происходит в инкубаторе. При использовании этой медицинской технологии наблюдение пронуклеусов имеет важное значение — по количеству и внешнему виду пронуклеусов оценивают жизнеспособность или патологичность формирующегося эмбриона. В нормально сформированной зиготе наблюдаются два пронуклеуса (мужской и женский), они имеют относительно равные размеры, сближены, в пронуклеусах сформированы ядрышки (так называемые «пронуклеоли» или «проядрышки»), которые внутри пронуклеусов представлены в определенном количестве и расположены определенным образом. На основе внешнего вида пронуклеусов разработаны системы оценки жизнеспособности эмбрионов человека. Наиболее распространена система оценки Яна Тесарика. Менее известна система оценки Линетты Скотт.

Патологии формирования пронуклеусов многообразны. Присутствие в зиготе одного пронуклеуса может свидетельствовать о партеногенетической активации яйцеклетки (активация без участия сперматозоида). Наличие трёх пронуклеусов является признаком аномального оплодотворения: либо в яйцеклетку проникли два сперматозоида, либо третий пронуклеус сформирован из материала невыделившегося второго полярного тельца; также возможны случаи формирования лишнего пронуклеуса путём аномального формирования ядерной мембраны (то есть фактически материал двух пронуклеусов распределяется по трем ядрам). Эмбрионы, образующиеся из трипронуклеарных зигот, зачастую являются трипроидными, несут аномальный тройной набор хромосом. Такие эмбрионы нежизнеспособны и обычно погибают до имплантации. Но в редких случаях триплоидные эмбрионы имплантируются в матку женщины. Беременность, возникшая в результате имплантации триплоидного эмбриона всегда патологична. Если имплантируется триплоидный эмбрион, образовавшийся из зиготы, несшей два женских пронуклеуса и один мужской, то сформированный плод характеризуется задержкой роста, макроцефалией, слабым развитием плаценты, беременность заканчивается спонтанным выкидышем. Если имплантируется триплоидный эмбрион, образовавшийся из зиготы, несшей два мужских пронуклеуса и один женский, то вместо нормального плода формируется неполный пузырный занос — гипертрофированное разрастание ткани трофобласта, склонной к малигнизации. В 15-20 % случаев пузырный занос перерождается в «трофобластическую болезнь», в том числе в хориокарциному, ведет себя как злокачественная опухоль, то есть внедряется в здоровые ткани и дает метастазы. В этой связи анализ морфологии пронуклеусов в зиготе человека имеет большое значение в технологии экстракорпорального оплодотворения, не рекомендуется переносить в матку женщины эмбрионы с тремя пронуклеусами. При естественном оплодотворении трипронуклеарные зиготы также формируются, около 10 % спонтанных выкидышей приходится на триплоидные эмбрионы.

> Примечания > См. также

  • Зачатие у человека

Ссылки

  • Пронуклеус // Энциклопедический словарь Брокгауза и Ефрона : в 86 т. (82 т. и 4 доп.). — СПб., 1890—1907.
  • Пронуклеус — статья из Большой советской энциклопедии.

Оценка качества эмбрионов

Центральным звеном клиники ЭКО является эмбриологическая лаборатория. Для каждой попытки ЭКО заводится «Эмбриологический протокол», в котором отражается судьба каждого эмбриона от момента получения ооцитов и до момента переноса или замораживания.

Сразу после получения ооцитов и сперматозоидов производится их морфологическая оценка. По результатам анализа эякулята (спермограмме) принимают решение о способе оплодотворения – ЭКО или ИКСИ.

Оценка ооцитов Оплодо-
творение
Стадия развития эмбрионов Вид ВРТ (ЭКО/ИКСИ)
День после пункции 0 1 2 3 4 5 Итог
Дата 07.03 08.03 09.03 10.03 11.03 12.03 13.03
Эмбриолог Калинина Сергеев Калиниа Калиниа Калиниа Сергеев
1 Калинина И.И. MII 2 pN 4 AB 6 AB Cryo (Bl Ab 3) Cryo ИКСИ
2 Калинина И.И. MII 2 pN 4 AB 6 BA Cryo (Bl Bb 3) Cryo ИКСИ
3 Калинина И.И. MII 2 pN 4 AB 8 AB Cryo (Bl Bb 2) Cryo ИКСИ
4 Калинина И.И. MII 2 pN 4 AB 8 AB Cryo (Bl Ab 2) Cryo ИКСИ
5 Калинина И.И. 0-1 2 pN 4 AB 7 AB ET (Bl Aа 3) ET ЭКО
6 Калинина И.И. 0-1 1 pN 4 AB 8 AB Cryo (Bl Bb 3) Cryo ЭКО
7 Калинина И.И. 0-1 1 pN 4 AB 8 AB Cryo (Bl Bс 2) Cryo ЭКО
8 Калинина И.И. 0-1 2 pN 4 AB 8 AB ET (Bl Аb 4) ET ЭКО
9 Калинина И.И. 0-1 2 pN 6 AB 8 B 8B ЭКО

Описание: День 0. Непосредственно после пункции оценивают зрелость полученных ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК). ОКК с прозрачным кумулюсом как правило содержит зрелый ооцит и получает оценку «1-1».При пункции возможно получение зрелых, незрелых, а также дегенеративных и разрушенных яйцеклеток. Точная оценка состояния ооцита возможна только после его очистки перед проведением ИКСИ.

В зрелых, готовых к оплодотворению ооцитах определяется первое полярное тельце. В эмбриологическом протоколе зрелый ооцит обозначают MII.

Если процесс созревания ооцита в фолликуле нарушен или неправильно введен триггер (ХГ), то существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV (Рис.1). Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg).

Рис 1. Ооциты, полученные при пункции яичников после удаления кумулюса (денюдации). А — MII, Б – MI, В – GV. Pb – полярное тельце, ZP – блестящая оболочка

Через 18-20 часов после добавления сперматозоидов или ИКСИ (1-е сутки) при нормальном оплодотворении образуются два пронуклеуса. Это предшественники ядер будущих клеток-бластомеров, на которые начинает делиться оплодотворенная яйцеклетка. При правильном оплодотворении оба пронуклеуса четко различимы. В этом случае им присваивают оценку 2pN. Если пронуклеусов не видно, что обычно связано с отсутствием оплодотворения, в протокол записывается 0pN. При неправильном оплодотворении возможно появление нескольких пронуклеусов, что отражается в записи, например 3pN, 6pN и т.д.(Рис2). «Неправильно» оплодотворенные ооциты не пригодны для дальнейшей работы и утилизируются.

Рис 2. Первый день развития in vitro – формирование зиготы и образование пронуклеусов. А – 2pN (нормальное оплодотворение) – два пронуклеуса Б – 3pN (аномальное оплодотворение) – больше, чем два пронуклеуса.

Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение пяти-шести дней. Оценка качества эмбрионов проводится через 40-42 часа (2 сутки), 72-74 часа (3 сутки) и 120 часов (5 сутки) после оплодотворения. Дробление эмбриона должно быть симметричным (получаются бластомеры одинакового размера) и равномерным (все бластомеры претерпевают деление). Для наглядности эмбриологи используют численно – буквенную систему оценки качества, где цифра означает количество бластомеров, а буква их качество. Для обозначения эмбриона хорошего качества используется буквенный индекс «А», среднего «B», низкого «С». Возможны и промежуточные варианты, например АВ, ВА, ВС, СВ, когда сложно дать однозначную оценку (Рис3).

2-й день (4А) 3-й день (8А) 4-й день (comp)

Рис 3. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro и компактная морула на 4-й день развития. Представлены эмбрионы отличного (А) качества. B – бластомер ZP – блестящая оболочка.

Для второго дня культивирования перспективными считаются эмбрионы с четырьмя бластомерами — 4А, 4АВ, 4В. Для третьего — восьмиклеточные (8А, 8АВ, 8В). Эмбрионы плохого качества (ВС, СВ, С) как правило не переносят, оставляют до пятого дня и при формировании нормальной бластоцисты замораживают или переносят в матку. В случае неравномерного дробления (наличия бластомеров разной величины) потенциал эмбриона к имплантации снижен, и обозначается это приставкой «un», например 3Вun. Наличие фрагментов цитоплазмы обозначают «fr», например 8ВСfr (Рис.4). Оценивается и наличие вакуолей. При их визуализации ставится отметка «vac». В норме каждый бластомер несет одно ядро, если хотя бы в одном бластомере визуализируется больше одного ядра, это называется мультинуклеацией (mN) и указывает на значительную вероятность хромосомной патологии данного эмбриона.


Рис 4. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro. Представлены эмбрионы хорошего (ВА, В) и удовлетворительного (ВС) качества. Во втором ряду эмбрионы с неравномерным дроблением (3Bun и 4BAun).

К концу третьих и на четвертые сутки культивирования эмбрион начинает компактизацию (границы его клеток становятся неразличимы) и готовится к образованию бластоцисты. Его клетки могут быть частично (p.comp) или полностью компактизованы (comp) (Рис.5). Обычно оценка эмбрионов на четвертые сутки не проводится ввиду малой информативности данной стадии развития. Однако наличие компактизации на вторые сутки может свидетельствовать об аномальном развитии и обязательно должна отражаться в эмбриологическом протоколе.

Рис 5. Стадия компактизации 4-е сутки культивирования A – p.comp Б — comp

На пятые сутки, примерно через 120 часов после оплодотворения эмбрион образует бластоцисту (Bl) (Рис.6). Оценка качества бластоцист подразумевает ее размер, который отражается цифрами от 1 до 5; состояние внутренней клеточной массы (ВКМ) (от «A» до «С») и окружающих ее клеток – трофобласта (от «а» до «с»). Лучшими для переноса будут бластоцисты размера от 3 до 5, имеющие многоклеточную ВКМ и трофобласт – Bl4Aa, Bl4Ab. Бластоцисты среднего качества обозначаются как – Bl2Bb, Bl3Bb, а плохого – BlCc.

Рис 6. Бластоцисты на пятый день развития in vitro. e.bl – ранняя бластоциста, Bl3Ab – экспандированная бластоциста, Bl5Ab – бластоциста перед хетчингом, ВКМ – внутренняя клеточная масса.

Дальнейшее развитие эмбриона происходит уже в матке после имплантации. Для успешной имплантации бластоцисте необходимо выйти из окружающей ее блестящей оболочки. Данный процесс называется вылупление, или хетчинг. В случае, когда эмбриолог отмечает изменения блестящей оболочки и после криоконсервации эмбрионов процесс самостоятельного вылупления бластоцисты может быть затруднен и его возможно облегчить применяя вспомогательный хетчинг. В нашем центре мы используем наиболее эффективный лазерный вспомогательный хетчинг.

Самая высокая частота оплодотворения получена при переносе эмбрионов на стадии бластоцисты. Так, в нашем центре она составляет 53%. В то время, как при переносе на стадии 6-8 бластомеров – 47%.

Замораживание и ПГД также лучше всего выполнять на стадии бластоцисты. Однако, не все эмбрионы доходят до бластоцисты. Поэтому общепринятым считается следующий подход: если на 5 день культивирования имеется меньше 5 эмбрионов, как минимум один переносят, остальные оставляют до 5 дня. Из достигших бластоцисты еще один может быть перенесен (двойной перенос), остальные замораживают. Если на 3 день эмбрионов 5 и больше, их не переносят и оставляют культивировать до 5 дня. На 5 день одну, реже две бластоцисты переносят, остальные замораживают.

В заключение следует отметить, что описываемые морфологические критерии оценки качества эмбрионов являются основными, необходимыми, но не всегда достаточными для выбора эмбриона для переноса. Так, нередко после переноса эмбрионов высшего качества имплантация не наступает и, наоборот, бывают случаи наступления и успешного развития беременности при переносе эмбрионов плохого качества. Поэтому существуют дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-laps, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.

Бластоциста в процессе хетчинга (выхода из блестящей оболочки для имплантации)

А – световая микроскопия HMC контраст Б – Сканирующая электронная микроскопия — ZP – блестящая оболочка TE – трофэктодерма ВКМ – внутренняя клеточная масса

Эффективность ЭКО в многом зависит от того, как протекает эмбриологический этап: от качества полученных женских и мужских половых клеток, от того, как произошло оплодотворение яйцеклеток, а потом как происходит развитие эмбрионов при культивировании. На каждом этапе может произойти сбой, который явится причиной неудачи ЭКО. Рассмотрим основные моменты.

1. «Ооцитарный фактор» — это получение в цикле ЭКО яйцеклеток плохого качества. Общеизвестный факт, что с возрастом женщины качество ооцитов стремительно ухудшается.

У пациенток младше 35 лет, довольно редко, но также возможно получение яйцеклеток низкого качества. В таких ситуациях крайне сложно ответить на вопрос, с чем может быть это связано, но, как правило, с генетикой, с гормональной стимуляцией, эндометриозом, с различными эндокринными нарушениями (особенно часто с ожирением).

Сейчас активно ведутся исследования по изучению данного фактора бесплодия. Но, к сожалению, пока они не завершены и не имеют практического значения.

В случае установления ооцитарного фактора (а понять это возможно только при получении ооцитов при пункции фолликулов) предлагается замена протокола гормональной стимуляции, переход на ЭКО в естественном цикле. При неэффективности этих схем, переход на ЭКО с донорскими ооцитами.

Плохое качество сперматозоидов не так прямо связано с возрастом мужчины, больше с различными внутренними и внешними неблагоприятными факторами, но также может быть причиной неудач ЭКО.

2. Неправильное оплодотворение

В яйцеклетке и сперматозоиде в норме содержится по 23 хромосоме. В процессе оплодотворения в яйцеклетке формируется 2 клеточных ядра (пронуклеуса) — 2 pn — женское и мужское. Оплодотворённая яйцеклетка (зигота) содержит в норме 46 хромосом (23 от матери и столько же от отца).

Пронуклеусы в оплодотворённой яйцеклетке становятся видны через 12-14 ч после проникновения в неё сперматозоида. Через 19-22 часа пронуклеусы исчезают и формируется метафазная пластинка, а ещё через 3-4 часа начинается деление зиготы.

Послее дробления зиготы с аномалиями оплодотворения могут быть неотличимы от нормально оплодотворённых ооцитов. Поэтому наблюдение пронуклеусов имеет важное значение — по их количеству оценивается правильное формирование эмбриона.

Встречаются следующие патологии формирования пронуклеусов:

— 1 pn — присутствие в зиготе одного пронуклеуса может говорить об активации яйцеклетки без участия сперматозоида, реже — о слиянии ядер гамет и образование диплоидной зиготы с одним пронуклеусом;

— 3 pn — наличие 3-х пронуклеусов возможно при :

— * оплодотворении одной яйцеклетки 2-мя сперматозоидами;

— * формирование 3-го пронуклеуса из материала невыделившегося второго полярного тельца;

— * формирование 3-го пронуклеуса путём аномального формирования ядерной мембраны ;

— реже встречаются >3 pn.

ИКСИ (введение одного сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки) не гарантирует правильного оплодотворения. Это объясняется главным образом сохранением второго полярного тела во время второго мейотического деления ооцита. Но 3 pn при этом варианте оплодотворения встречается реже, по разным данным ~ 2-3% против 8-12 % при оплодотворении методом ЭКО.

В неправильном оплодотворении могут играть роль следующие факторы:

— повышенные уровни эстрогенов в стимулированном цикле;

— продолжительность гормональной стимуляции;

— качество сперматозоидов;

— качество ооцита («гигантские» ооциты предрасположены к неправильному оплодотворению);

— поздний репродуктивный возраст женщины (по данным американских учёных H. J. Kang, Z. Rosenwaks частота оплодотворения и 3 pn достоверно выше у пациенток после 39 лет, несмотря на метод оплодотворения)

3. Остановка развития эмбрионов после правильного оплодотворения

В современных эмбриологических лабораториях процесс культивирования эмбрионов отработан до мелочей и тщательно соблюдается: индивидуальное культивирование эмбриона в планшетных инкубаторах; постоянный многоуровневый контроль условий культивирования; своевременная смена питательных сред, если культивирование происходит в двухступенчатых средах.

Поэтому при стабильных условиях культивирования, причину плохого развития остается искать только в качестве самого материала.

На остановку эмбриогенеза влияет качество как самих яйцеклеток, так и качество сперматозоидов.

Как правило, основное влияние на ход эмбриогенеза оказывает возраст родителей. Хотя и в молодом возрасте может наблюдаться снижение качества яйцеклеток, например, при эндометриозе, неясном генезе бесплодия. Причиной могут быть аномалии в хромосомном наборе самих родителей.

Принято считать, что до 3 дня развития эмбрион живет и развивается на материнских запасах, то есть, остановка или ухудшение развития до 3 суток указывает на плохое качество яйцеклетки.

На 3 сутки развития начинает работать сам геном эмбриона. И здесь добавляются факторы, привнесенные в эмбрион сперматозоидом. К сожалению, очень многие отклонения от нормы в качестве сперматозоидов и хроматина внутри них оказывают влияние на развитие эмбриона и могут вызывать анеуплоидии или недостаточность генома эмбриона. Качество конденсации и организации ДНК сперматозоида является важным фактором развития эмбриона, даже при выполнении ИКСИ.

Но есть данные, что некоторое количество материнской мРНК сохраняется до стадии бластоцисты и может также участвовать в остановке развития.

Хромосомные аномалии, несомненно, вызывают большой процент потерь эмбрионов. Генетические факторы регулируют скорость предимплантационного развития эмбриона. Существует тенденция к увеличению количества анеуплоидных эмбрионов с увеличением возраста. Большая часть анеуплоидий летальна для эмбриона на ранних стадиях развития. Но некоторые анеуплоидии не мешают эмбриону стать бластоцистой хорошего качества, например, при трисомии по 21 хромосоме, или синдроме Дауна.

В связи с этим, пациентам позднего репродуктивного возраста рекомендуется проведение предимплантационного генетического скрининга до переноса эмбриона в полость матки.

Кроме того, у пар более молодого возраста, если в нескольких циклах ЭКО при переносе эмбриона хорошего качества на стадии бластоцисты в однородный, достаточной толщины и хорошо кровоснабжающийся эндометрий беременность не наступает, необходимо выполнение предимплантационного генетического скрининга на все хромосомы. И, соответсвенно, переносить в полость матки эмбрион только с полным хромосомным набором.

Трофимова Ольга Алексеевна Репродуктолог
Кандидат медицинских наук
Заведующая Отделением ЭКО
Клиника «Мать и дитя» Юго-Запад
Другие статьи автора

  • Автор статьи — врач акушер-гинеколог, репродуктолог Клиники «Мать и дитя» Юго-Запад, Трофимова Ольга Алексеевна.

  • Автор статьи — врач акушер-гинеколог, репродуктолог Клиники «Мать и дитя» Юго-Запад, Трофимова Ольга Алексеевна.

Рубрики: Статьи

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *